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尼康顯微鏡:活細(xì)胞成像對(duì)光學(xué)系統(tǒng)和CCD的要求
在活細(xì)胞研究設(shè)計(jì)的光學(xué)顯微鏡系統(tǒng),主要考慮檢測(cè)器的靈敏度(信號(hào)與噪聲),圖像采集所需要的速度,以及標(biāo)本的可行性。相對(duì)較高的光照強(qiáng)度和較長的曝光時(shí)間,通常采用固定的細(xì)胞和組織(如漂白是主要的考慮因素)中記錄圖像時(shí),必須嚴(yán)格避免與活細(xì)胞。在幾乎所有的情況下,活細(xì)胞顯微代表了一種妥協(xié)之間實(shí)現(xiàn)最佳的圖像質(zhì)量和保持健康的細(xì)胞。不必要的過采樣的時(shí)間點(diǎn),使細(xì)胞含量超標(biāo)的照明,空間分辨率和時(shí)間分辨率的實(shí)驗(yàn),而不是
2020-09-04
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奧林巴斯顯微鏡:熒光的基本概念
熒光是敏感,其中創(chuàng)建的物理(例如,光的吸收),機(jī)械(摩擦),或化學(xué)機(jī)制從電子激發(fā)態(tài)的分子發(fā)光的無處不在的發(fā)光過程家族的成員。通過由紫外線或可見光的光子的分子的激發(fā)發(fā)光發(fā)電的是這樣一種現(xiàn)象稱為光致發(fā)光,正式分為兩大類,熒光和磷光,這取決于激發(fā)態(tài)的電子組態(tài)和排放路徑。熒光是一些原子和分子的屬性,在一個(gè)特定的波長吸收光,并隨后經(jīng)過短暫的時(shí)間間隔更長的波長的光發(fā)射被稱為熒光壽命。發(fā)生的方法的磷光熒光的方式
2020-09-04
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尼康顯微鏡:活細(xì)胞成像的培養(yǎng)室
標(biāo)本室是一個(gè)不可或缺的關(guān)鍵分支,在活細(xì)胞成像的歷史和廣泛的設(shè)計(jì)描述系統(tǒng),提供卓越的光學(xué)性能,同時(shí)允許不同時(shí)間量要保持標(biāo)本多年來已經(jīng)發(fā)布。從密封蓋玻片載玻片上,使幾乎所有的環(huán)境變量的嚴(yán)格控制到復(fù)雜的灌注室編寫的簡單的復(fù)雜程度不等,培養(yǎng)室被設(shè)計(jì)為,允許活標(biāo)本觀察微創(chuàng)高分辨率。不管他們的設(shè)計(jì),活細(xì)胞成像室必須滿足各種要求,才能被成功地應(yīng)用在實(shí)驗(yàn)中。應(yīng)易于消毒室,實(shí)驗(yàn)室環(huán)境完全隔離觀察期間盡量減少暴露在污
2020-09-04
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奧林巴斯顯微鏡:霍夫曼調(diào)制對(duì)比的結(jié)構(gòu)
霍夫曼調(diào)制對(duì)比系統(tǒng),旨在提高可見度和對(duì)比度染色的和有生命的物質(zhì),通過檢測(cè)光梯度(或斜坡),并把它們轉(zhuǎn)換成光強(qiáng)度的變化。羅伯特·霍夫曼博士在1975年發(fā)明了這種技術(shù),并采用了幾個(gè)配件,已經(jīng)適應(yīng)了一些商業(yè)顯微鏡?;舴蚵{(diào)制對(duì)比度的基本顯微鏡的配置在圖1中示出。一種光振幅空間濾波器,被稱為“ 調(diào)制”的霍夫曼,被插入一個(gè)消色差透鏡或平場(chǎng)消色差物鏡的后焦平面上(雖然也可以用于更高的修正)。通過本系統(tǒng)的光強(qiáng)度
2020-09-04
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尼康顯微鏡:電動(dòng)顯微鏡的結(jié)構(gòu)
電動(dòng)顯微鏡部件及配件啟用研究者活細(xì)胞圖像采集自動(dòng)化,范圍從毫秒到幾十或數(shù)百分鐘的時(shí)間刻度間隔時(shí)間推移實(shí)驗(yàn)是特別有用的。可以加裝各種各樣的售后輔助部件,如機(jī)電遮光器,電動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)盤,微處理器控制的濾波器切換(濾光輪),電動(dòng)載物臺(tái),和軸向聚焦控制機(jī)制的研究級(jí)顯微鏡和交互控制由一個(gè)同伴工作站計(jì)算機(jī)使用市售圖像采集軟件包。然而,應(yīng)該注意的是,組裝一個(gè)完全自動(dòng)化的和優(yōu)化的多維光學(xué)成像系統(tǒng)是一個(gè)非常復(fù)雜的任務(wù)。
2020-09-04
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尼康顯微鏡:熒光顯微鏡的結(jié)構(gòu)
由有機(jī)和無機(jī)樣品的光的吸收,隨后再輻射通常是既定的物理現(xiàn)象作為熒光或磷光的結(jié)果。通過光的發(fā)射熒光過程幾乎是同時(shí)地吸收的激發(fā)光的光子的吸收和發(fā)射,取值范圍通常小于一微秒的持續(xù)時(shí)間相對(duì)較短的時(shí)間之間的延遲。當(dāng)發(fā)射仍然存在更長的時(shí)間后已經(jīng)熄滅的激發(fā)光,該現(xiàn)象被稱為磷光。首先描述英國科學(xué)家喬治爵士G.斯托克斯于1852年,是負(fù)責(zé)這一術(shù)語時(shí),他觀察到的礦物螢石發(fā)出紅光,當(dāng)它被照亮的紫外線激發(fā)熒光。斯托克斯指
2020-09-04
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奧林巴斯顯微鏡:激光共聚焦顯微鏡系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)
中常用的激光掃描共聚焦顯微鏡的激光是高強(qiáng)度的單色光源,這是有用的工具的各種技術(shù),包括光學(xué)捕獲,壽命成像研究,光漂白恢復(fù),和全內(nèi)反射熒光。此外,激光掃描共聚焦熒光顯微鏡的光源,也是最常見的,并已動(dòng)用,雖然次數(shù)不多,在傳統(tǒng)的寬視場(chǎng)熒光調(diào)查。激光器發(fā)出強(qiáng)烈的包單色光的協(xié)調(diào)性和高度平行,形成一個(gè)嚴(yán)密的光束,以非常低的速度擴(kuò)張。比起其它光源,由激光發(fā)射極純的波長范圍鹵鎢燈或電弧放電燈是無與倫比的帶寬和相位關(guān)
2020-09-04
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尼康顯微鏡:水浸物鏡的結(jié)構(gòu)
薄切固定的組織切片和活細(xì)胞附著到玻璃基板上的微觀調(diào)查,定期制作精湛的高清晰度圖像時(shí),用人的計(jì)劃復(fù)消色差透鏡或螢石物鏡的具有高數(shù)值孔徑。然而,目前的生物研究的顯著量的涉及到生物體組織內(nèi),其中重要的事件可能會(huì)發(fā)生內(nèi)的檢體的深部,遠(yuǎn)離玻璃蓋的細(xì)胞動(dòng)力學(xué)調(diào)查。嘗試細(xì)胞的細(xì)節(jié)圖像,并與傳統(tǒng)的油浸技術(shù)從標(biāo)本玻璃蓋千分尺距離活動(dòng)經(jīng)常遭受的文物,包括嚴(yán)重的光學(xué)像差(球形)。作為液浸介質(zhì)中,使用水代替油,是一種有效
2020-09-04