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![尼康顯微鏡：熒光激發(fā)塊的分類]()
尼康顯微鏡：熒光激發(fā)塊的分類
落射熒光的干擾和吸收濾色鏡組合被安置在濾色鏡立方體（或光學(xué)塊），并包括激發(fā)濾光片，二色性分束器（通常稱為反光鏡），和光柵（或發(fā)射）的濾色鏡，如在圖1中示出（一）。使用本指南中選擇適當(dāng)?shù)臑V色鏡設(shè)置為廣角熒光顯微鏡調(diào)查所用的發(fā)色團(tuán)的激發(fā)和發(fā)射光譜特性相匹配。作為一個(gè)例子，圖1（b）給出一個(gè)典型的高性能帶通發(fā)射藍(lán)光激發(fā)濾色鏡組合的光譜。尼康熒光濾光器組合中所提供窄，中，寬的通帶激發(fā)版本與相應(yīng)的發(fā)射濾色鏡
2020-09-04
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![尼康顯微鏡：熒光顯微鏡的結(jié)構(gòu)]()
尼康顯微鏡：熒光顯微鏡的結(jié)構(gòu)
由有機(jī)和無(wú)機(jī)樣品的光的吸收，隨后再輻射通常是既定的物理現(xiàn)象作為熒光或磷光的結(jié)果。通過(guò)光的發(fā)射熒光過(guò)程幾乎是同時(shí)地吸收的激發(fā)光的光子的吸收和發(fā)射，取值范圍通常小于一微秒的持續(xù)時(shí)間相對(duì)較短的時(shí)間之間的延遲。當(dāng)發(fā)射仍然存在更長(zhǎng)的時(shí)間后已經(jīng)熄滅的激發(fā)光，該現(xiàn)象被稱為磷光。首先描述英國(guó)科學(xué)家喬治爵士G.斯托克斯于1852年，是負(fù)責(zé)這一術(shù)語(yǔ)時(shí)，他觀察到的礦物螢石發(fā)出紅光，當(dāng)它被照亮的紫外線激發(fā)熒光。斯托克斯指
2020-09-04
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![尼康顯微鏡：熒光蛋白的成像參數(shù)]()
尼康顯微鏡：熒光蛋白的成像參數(shù)
迄今發(fā)現(xiàn)的熒光蛋白及衍生工具的廣泛用途相當(dāng)廣泛，并已成功地應(yīng)用在幾乎每一個(gè)生物學(xué)科從微生物系統(tǒng)生理學(xué)。這些獨(dú)特的探頭已經(jīng)證明是非常有用的記者在培養(yǎng)細(xì)胞和整個(gè)動(dòng)物的基因表達(dá)研究。熒光蛋白在活細(xì)胞中，最常用的跟蹤本地化和動(dòng)態(tài)的蛋白質(zhì)，細(xì)胞器，和其他細(xì)胞區(qū)室，以及細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)運(yùn)輸示蹤劑。很容易地完成了多種技術(shù)，其中包括寬視場(chǎng)，共聚焦和多光子顯微鏡，熒光蛋白的定量成像曝光細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的復(fù)雜性，提供了一個(gè)
2020-09-04
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![奧林巴斯顯微鏡：全內(nèi)反射熒光顯微鏡的介紹]()
奧林巴斯顯微鏡：全內(nèi)反射熒光顯微鏡的介紹
全內(nèi)反射顯微鏡（TIRFM）是單分子熒光觀察用光學(xué)方法。有些生物物理學(xué)家已經(jīng)使用該技術(shù)多年，有的則是剛剛開(kāi)始探索這種多功能的機(jī)制研究現(xiàn)象在接口的界限。今天，技術(shù)日益普及與細(xì)胞生物學(xué)家和神經(jīng)科學(xué)家用它來(lái)觀察細(xì)胞膜熒光，部分是因?yàn)橐呀?jīng)開(kāi)發(fā)了新的膜專用染料。在過(guò)去，全內(nèi)反射熒光顯微鏡難以執(zhí)行由于顯微鏡設(shè)置的復(fù)雜性，以及達(dá)到可接受的圖像的亮度的問(wèn)題。本應(yīng)用筆記討論了最近開(kāi)發(fā)的高數(shù)值孔徑顯微鏡物鏡，提高的T
2020-09-04
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尼康顯微鏡，落射熒光照明
?直到最近，熒光照明只有在配備專門(mén)的高數(shù)值孔徑物鏡究級(jí)復(fù)合顯微鏡可用的選項(xiàng)。?需要對(duì)這種技術(shù)在立體顯微鏡已經(jīng)升級(jí)，推出基因編碼和特定的生物熒光蛋白如GFP（綠色熒光蛋白）的。立體顯微鏡的觀察GFP的應(yīng)用程序現(xiàn)在如此普遍，立體聲熒光照明器更經(jīng)常被稱為GFP的照明?，即使它們可以用于在生命科學(xué)和電子制造行業(yè)既許多其他應(yīng)用。?大的標(biāo)本，如幼蟲(chóng)，線蟲(chóng)，斑馬魚(yú)，卵母細(xì)胞，和成熟的昆蟲(chóng)可以容易地選擇和操縱的時(shí)
2020-09-03
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![尼康顯微鏡：熒光蛋白的成像參數(shù)]()
尼康顯微鏡：熒光蛋白的成像參數(shù)
迄今發(fā)現(xiàn)的熒光蛋白及衍生工具的廣泛用途相當(dāng)廣泛，并已成功地應(yīng)用在幾乎每一個(gè)生物學(xué)科從微生物系統(tǒng)生理學(xué)。這些獨(dú)特的探頭已經(jīng)證明是非常有用的記者在培養(yǎng)細(xì)胞和整個(gè)動(dòng)物的基因表達(dá)研究。熒光蛋白在活細(xì)胞中，最常用的跟蹤本地化和動(dòng)態(tài)的蛋白質(zhì)，細(xì)胞器，和其他細(xì)胞區(qū)室，以及細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)運(yùn)輸示蹤劑。很容易地完成了多種技術(shù)，其中包括尼康顯微鏡，寬視場(chǎng)，共聚焦和多光子顯微鏡，熒光蛋白的定量成像曝光細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的復(fù)雜性
2020-09-03
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![徠卡顯微鏡：多波長(zhǎng)在熒光顯微鏡落射照明]()
徠卡顯微鏡：多波長(zhǎng)在熒光顯微鏡落射照明
熒光是一個(gè)過(guò)程，其中已吸收的光（光子）后的物質(zhì)emitts的輻射的波長(zhǎng)（顏色），其中長(zhǎng)于吸收光，這個(gè)排放停止后立即停止激發(fā)。這種現(xiàn)象是熒光顯微鏡及其應(yīng)用的基本元素。除此之外，“古典”在光學(xué)顯微鏡下的熒光激發(fā)，有可能兩個(gè)或多個(gè)光子具有較長(zhǎng)wavengths比發(fā)射的激發(fā)激光共聚焦掃描顯微鏡通過(guò)現(xiàn)代技術(shù)來(lái)獲得相同的發(fā)光效果。 熒光作為autofluorescenc的生物和/或無(wú)機(jī)結(jié)構(gòu)或所謂的次級(jí)熒光的
2020-09-03
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![尼康顯微鏡：活細(xì)胞成像的光學(xué)系統(tǒng)和探測(cè)器的要求]()
尼康顯微鏡：活細(xì)胞成像的光學(xué)系統(tǒng)和探測(cè)器的要求
在活細(xì)胞的調(diào)查設(shè)計(jì)的光學(xué)顯微系統(tǒng)時(shí)，主要考慮因素是檢測(cè)器的靈敏度（信號(hào) - 噪聲），所需要的圖像采集速度，和標(biāo)本的可行性。相對(duì)較高的光強(qiáng)度和較長(zhǎng)的曝光時(shí)間，通常采用在記錄圖像固定的細(xì)胞和組織（如漂白為主要考慮因素），必須嚴(yán)格避免工作時(shí)，與活細(xì)胞。在幾乎所有的情況下，活細(xì)胞顯微鏡代表實(shí)現(xiàn)最佳的圖像質(zhì)量，并保持健康的細(xì)胞之間的一種折衷。不必要的采樣時(shí)間點(diǎn)，使細(xì)胞過(guò)度的照明水平，而不是實(shí)驗(yàn)設(shè)置的時(shí)空分辨
2020-09-03
