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奧林巴斯顯微鏡:偏光顯微鏡構(gòu)造

2020-09-03 14:53:31

偏振光顯微鏡來(lái)觀察和拍攝標(biāo)本,是可見(jiàn)的,主要是由于它們的光學(xué)各向異性的字符。 為了完成這一任務(wù),在顯微鏡必須配備兩個(gè)偏振器 ,定位在光路中的某個(gè)地方之前的試樣,和分析器 (第二偏振片)之間的物鏡的后孔觀察管中的光學(xué)路徑下或攝像機(jī)港口。

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從平面偏振光的雙折射 (或由雙折射)試樣產(chǎn)生兩個(gè)單獨(dú)的,各自在相互垂直的平面偏振波分量的相互作用而產(chǎn)生的圖像對(duì)比度。 這些組件的速度是不同的,不同的傳播方向通過(guò)試樣。 退出后的試樣,成為光分量彼此同相,但再結(jié)合和相消干涉時(shí),通過(guò)分析儀。

當(dāng)各向異性標(biāo)本被帶進(jìn)通過(guò)重點(diǎn)和旋轉(zhuǎn)360度的一個(gè)圓偏振光顯微鏡階段,將依次出現(xiàn)光明和黑暗(已滅絕),根據(jù)旋轉(zhuǎn)位置。 當(dāng)試樣的長(zhǎng)軸的方向在45度角的偏振器軸,最大程度的亮度將被實(shí)現(xiàn)的,并最大程度的消光時(shí),將觀察到的兩條軸線重合。 標(biāo)本能見(jiàn)度在360度的范圍內(nèi)旋轉(zhuǎn),將光明和黑暗之間的四次振蕩,在90度的增量。 這是由于這樣的事實(shí),當(dāng)偏振光影響的振動(dòng)方向平行于光軸的雙折射的試樣時(shí),上述照明振動(dòng)將與主軸配合的試樣,它就會(huì)出現(xiàn)各向同性(暗色調(diào)或滅絕)。 如果試樣方向改變45度,入射光線將被解決的標(biāo)本,分為普通和非凡的組件,然后再團(tuán)結(jié)在分析儀產(chǎn)生的干涉條紋。 由于只發(fā)生干擾時(shí),偏振光具有相同的振動(dòng)方向時(shí),觀察到的最大雙折射檢體的主平面上的照明之間的角度允許振動(dòng)方向重疊。 重組的白色光分析儀中的振動(dòng)面之間的干擾通常會(huì)產(chǎn)生的光譜的顏色,這是由于殘留的互補(bǔ)色而產(chǎn)生的白色光的相消干涉。 用白色光照明下觀察到的顏色在顯微鏡目鏡可以利用有關(guān)路徑差異和試樣的折射率是已知的試樣的厚度值時(shí),定量地得出結(jié)論。

利用偏光顯微鏡區(qū)分單獨(dú)的折射(光學(xué)各向同性)和雙折射(光學(xué)各向異性)媒體。 各向異性的物質(zhì),如單軸或雙軸晶體型聚合物,或液晶,在偏振光顯微鏡中產(chǎn)生的干擾的影響,從而在圖像中的顏色和亮度的差異,通過(guò)目鏡觀察中拍攝的影片,或作為一個(gè)的數(shù)字圖像。 此技術(shù)是非常有用的雙重折射介質(zhì)通過(guò)長(zhǎng)鏈分子間的相互作用在天然和合成聚合物和相關(guān)材料的晶格點(diǎn)或取向的取向方向研究。 還研究了偏振光應(yīng)力透明的單獨(dú)折射介質(zhì)(例如玻璃),其折射率和雙折射各向異性的物質(zhì)通過(guò)廣泛的識(shí)別和表征。

在圖1所示的顯微鏡配備雙折射標(biāo)本在偏振光下檢查所有的標(biāo)準(zhǔn)配件。 雖然類似的共同的明視場(chǎng)顯微鏡,偏光顯微鏡包含這個(gè)類的工具特有的附加組件。 這些包括偏振器和分析器,無(wú)應(yīng)變的物鏡和聚光鏡,一個(gè)圓形刻度階段能夠360度旋轉(zhuǎn),在顯微鏡主體的開(kāi)口部或中間管為全波的相位差板,石英楔子,貝雷補(bǔ)償器,或四分之一波長(zhǎng)板。 圖1中的單筒顯微鏡觀察筒采用了直板設(shè)計(jì),并且還包含一個(gè)360度的旋轉(zhuǎn)儀,搖擺出伯特蘭透鏡,讓錐光畸變的雙折射標(biāo)本檢查。 的物鏡(4,10,和40倍的)都裝在配有一個(gè)單獨(dú)的定心裝置的安裝,圓形的階段有一個(gè)直徑為140毫米的夾緊螺釘和一個(gè)可附加的機(jī)械載物臺(tái) 除去從光路的偏振器和分析器(而其他組件留在原地)呈現(xiàn)為一個(gè)典型的明視野顯微鏡的光學(xué)特性相對(duì)于儀器的。 偏振光是一個(gè)對(duì)比度增強(qiáng)技術(shù),提高得到的雙折射材料,當(dāng)相對(duì)于其他技術(shù),如暗視野,明視野照明,微分干涉對(duì)比,相襯,霍夫曼調(diào)制對(duì)比度,和熒光的圖像的質(zhì)量。

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典型的現(xiàn)代偏振光顯微鏡(明場(chǎng))(圖2)有一個(gè)燈箱,其中包含一個(gè)高能量的50至100瓦鎢鹵素?zé)?,連接到顯微鏡底座。 提供直流(DC)電壓的燈的變壓器通常是直接內(nèi)置到顯微鏡的基礎(chǔ)上,由一個(gè)電位器定位在底座的底部附近的燈開(kāi)關(guān)(燈電壓控制)來(lái)控制。 之間的燈箱和顯微鏡的基礎(chǔ)上是一個(gè)過(guò)濾器的磁帶盒,可拆卸的色彩校正,熱,中性密度濾光片的光學(xué)路徑中的位置。 此外,內(nèi)置于顯微鏡的基礎(chǔ)上,一個(gè)集光透鏡,的字段光圈孔徑光闌,和一第一表面的反射鏡,將光通過(guò)一個(gè)端口下方的聚光鏡直接放置在中央的顯微鏡的光學(xué)路徑。 這些組件的尺寸控制,強(qiáng)度和分布的光在照明領(lǐng)域。 被設(shè)計(jì)為無(wú)振動(dòng),以提供最佳的科勒照明的光源,用于整個(gè)基本系統(tǒng)。 在一般情況下,現(xiàn)代顯微鏡的照明光學(xué)系統(tǒng)是能夠提供控制的光以產(chǎn)生一個(gè)均勻,強(qiáng)烈照明視場(chǎng),即使燈發(fā)出的可見(jiàn)光,紅外線和近紫外輻射的非均勻譜。

在某些偏振光顯微鏡,所述照射器替換由平凹的臺(tái)下鏡(圖1)。 幾乎任何外部光源可以沖著鏡子,這是對(duì)聚光鏡光圈下偏振片定位角度。 此配置是很有用的,當(dāng)外部源的單色光,如鈉蒸氣燈,是必需的。 因?yàn)椴⒉幌薅ㄓ谝粋€(gè)永久的鎢鹵燈的照明強(qiáng)度,顯微鏡可以很容易地適合于高強(qiáng)度的光源,以觀察弱雙折射標(biāo)本。

偏光

偏光顯微鏡首次推出在十九世紀(jì),但不是采用偏振傳輸材料,光從堆棧設(shè)置在57度角入射平面玻璃板的反射偏振。 購(gòu)買,更高級(jí)的儀器依賴于專門(mén)切割和膠合在一起以形成一個(gè)棱鏡的一個(gè)晶體的雙折射率的材料(如方解石)。 白色的非偏振光的光束進(jìn)入此類型的結(jié)晶分離成兩個(gè)部分,在相互垂直的方向極化。 這些光線稱為尋常光線 ,而另一種是所謂的非尋常光的  尋常光折射中的雙折射晶體,在更大程度上,在全內(nèi)反射的角度,影響膠合表面。 其結(jié)果是,這種射線被反射棱鏡和消除由吸收的光的裝載。 異常光線穿過(guò)棱鏡,成為直線偏振光的光束直接通過(guò)聚光鏡和試樣定位在顯微鏡載物臺(tái)上。 幾個(gè)版本的這種偏光裝置(還受聘為分析儀),而這些通常被命名后,他們的設(shè)計(jì)師。 威廉·尼科爾,誰(shuí)第一個(gè)裂解和膠合在一起兩個(gè)冰洲石晶體與加拿大香脂在1829年被命名后,最常見(jiàn)的偏振棱鏡(如圖3所示)。 尼科爾棱鏡最初是用來(lái)測(cè)量雙折射的化合物的極化角,從而導(dǎo)致新的發(fā)展,可在偏振光和結(jié)晶物質(zhì)之間的相互作用的理解。

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圖3給出了一個(gè)典型的尼科爾棱鏡建設(shè)是一個(gè)例證。 雙重折射晶體雙折射材料,通常方解石,切斷沿平面標(biāo)記ABCD,然后粘合在一起的兩半,重現(xiàn)原來(lái)的晶體形狀。 白色光的非偏振光的光束進(jìn)入晶體從左側(cè)被分裂成兩部分組成,在相互垂直的方向極化。 這些光束之一(標(biāo)記為尋常光線)被折射在更大程度上影響了骨水泥的邊界以一定角度,在其通過(guò)最上面的晶面的棱鏡的全反射的結(jié)果。 另一束異常光線被折射在較小的程度,并通過(guò)作為一個(gè)平面上的光的偏振分束棱鏡退出。

其他棱鏡的配置建議,并在十九世紀(jì)和二十世紀(jì)初建造,但目前不再用于生產(chǎn)偏振光在大多數(shù)應(yīng)用中。 尼科爾的棱鏡是非常昂貴和笨重,有一個(gè)非常有限的光圈,這將限制其使用,在高放大倍率。 相反,偏振光現(xiàn)在最常用的產(chǎn)生具有在二色性介質(zhì)中的一組特定的振動(dòng)方向的光的吸收。 某些天然礦物,如碧璽,擁有此屬性,但很快在1932年發(fā)明的埃德溫·H.土地醫(yī)生合成電影超越了所有其他材料為介質(zhì)生產(chǎn)平面偏振光的首選。細(xì)小的晶粒,硫酸iodoquinine,在相同的方向上取向,被嵌入在一個(gè)透明的聚合物薄膜,以防止遷移和重新調(diào)整的結(jié)晶。 土地開(kāi)發(fā)的片材含有寶麗 ,這已成為公認(rèn)的通用術(shù)語(yǔ),這些片以商品名銷售的偏振膜。 任何設(shè)備能夠選擇平面偏振光自然(非偏振光)白光現(xiàn)在被稱為一個(gè)極性偏振片 ,這個(gè)名字在1948年首次推出AF哈里蒙德的。 今天,偏光片被廣泛用于液晶顯示器(LCD),太陽(yáng)鏡,攝影,顯微鏡,和無(wú)數(shù)的科學(xué)和醫(yī)學(xué)目的。

首先通過(guò)一個(gè)中立的直線寶麗來(lái)的HN型偏振片創(chuàng)建具有振動(dòng)矢量局限于一個(gè)單一的平面的平面偏振光光退出端口在顯微鏡基地。 H-薄膜是通過(guò)拉伸的聚乙烯醇片材對(duì)齊的長(zhǎng)鏈聚合物分子,這是隨后用碘浸漬。 這些薄膜是不那么有效的偏振比方解石棱鏡裝置,但不限制數(shù)值孔徑。 通常情況下,一對(duì)交叉偏振H-膜發(fā)送介于0.01%和40%的入射光,取決于膜的厚度。

在大多數(shù)顯微鏡上,位于偏振器上的光端口或聚光鏡的正下方的過(guò)濾器保持器。 在圖2中示出的顯微鏡具有一個(gè)旋轉(zhuǎn)偏振器組件緊貼在底座上的光端口。 的偏振片,可通過(guò)一個(gè)360度的角度旋轉(zhuǎn),通過(guò)的一個(gè)小的滾花鎖定螺釘鎖定成一個(gè)單一的位置,但一般是按照慣例,東 - 西的方向取向的。 其他顯微鏡通常具有偏振器,可能會(huì)或可能不會(huì)允許偏振器的轉(zhuǎn)動(dòng)通過(guò)安裝連接到臺(tái)下聚光組件殼體。 有些偏光片與制動(dòng),允許以固定的增量為45度的旋轉(zhuǎn)到位舉行。 從光路的偏振器應(yīng)該是可拆卸的,與一個(gè)樞軸或類似的裝置,當(dāng)顯微鏡使用這種模式時(shí),允許的最大的明場(chǎng)強(qiáng)度。

衍射的光的折射,并且發(fā)送的檢體收斂在物鏡的后焦面,然后向中間管(圖4中示出),該另一個(gè)偏振器,通常被稱為“分析儀”。 該分析儀是另一個(gè)HN型中立型線性偏光片的偏振濾光器的定位與定向在一個(gè)90度的角度相對(duì)于聚光鏡下方的偏振片的光的振動(dòng)方向。 按照慣例,在偏振片的振動(dòng)方向被設(shè)置為東,西(簡(jiǎn)稱EW位置),如圖所示的雙折射交互式Java教程。 決定分析儀,在南北方向(簡(jiǎn)稱NS),在90度角的偏振器的振動(dòng)方向的振動(dòng)方向的方向相同的約定。

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該分析儀被定位后的試片,無(wú)論是在一個(gè)以上的物鏡插槽或中間管之間的物鏡轉(zhuǎn)換器和觀察管。 年齡較大的偏光顯微鏡分析儀可具有被裝配到目鏡,眼睛附近的透鏡或平面(圖1)之前的中間圖像的某個(gè)地方。 這不是明智的偏光片放置在一個(gè)共軛像平面,可以成像因?yàn)閯澓?,不完善的地方,污垢,和表面上的碎片與試樣。簡(jiǎn)單的偏振光顯微鏡分析儀一般都有固定的,但更復(fù)雜的工具,可能有這樣的能力,分析儀在360度旋轉(zhuǎn)的繞光軸旋轉(zhuǎn),以將其從光路中與一個(gè)滑塊機(jī)構(gòu)。 這種類型的分析儀通常是裝有分度,某種形式的鎖定鉗。

使用偏振光顯微鏡之前,運(yùn)營(yíng)商應(yīng)該從舞臺(tái)刪除任何雙折射標(biāo)本和檢查,以確保偏光鏡是固定在標(biāo)準(zhǔn)的位置(通常通過(guò)點(diǎn)擊停止),光強(qiáng)度是最小的,當(dāng)分析儀設(shè)置到零刻度標(biāo)記。 如果配置正確,分析儀,振動(dòng)方向是南北偏光振動(dòng)平面時(shí)是面向東向西方向(這個(gè)方向現(xiàn)在是標(biāo)準(zhǔn)化)。 如果偏光器和分析儀都能夠旋轉(zhuǎn)的,它是可能的,他們可能會(huì)越過(guò)(與光的強(qiáng)度時(shí),至少減去一個(gè)標(biāo)本)甚至通過(guò)其允許的振動(dòng)方向是東西和南北分別。 這種情況下可能會(huì)被修正移動(dòng)偏振器零度單擊“停止”(或旋轉(zhuǎn)角),然后通過(guò)重新設(shè)置分析儀,以該參考點(diǎn)。 至關(guān)重要的是,偏振器和分析器的振動(dòng)面在適當(dāng)?shù)姆较蛉∠驎r(shí),相位差和/或補(bǔ)償板被插入到光路中的測(cè)量目的。

刻度標(biāo)記的偏振器和分析器的位置都沒(méi)有配備在年齡較大的顯微鏡,它是可以使用公知的雙折射的試樣的屬性來(lái)調(diào)整的方向的偏振器和分析器。 重結(jié)晶,尿素是優(yōu)良的用于此目的,因?yàn)榛瘜W(xué)形成長(zhǎng)允許的振動(dòng)方向的兩個(gè)平行和垂直于晶軸長(zhǎng)的樹(shù)突狀微晶。 純化的化學(xué)品少量(約5毫克)可以?shī)A之間的顯微鏡載玻片和蓋玻片,然后小心地用本生燈或熱板加熱,直到晶體融化。 一旦液化,玻璃蓋可被壓到幻燈片上,以盡量減少的尿素夾層的厚度,然后使之冷卻。 重結(jié)晶后,滑動(dòng)被放置在偏振光顯微鏡載物臺(tái)上的結(jié)晶面向東 - 西在目鏡標(biāo)線片作為參考使用的十字線的長(zhǎng)軸。 偏振器和分析器,然后作為一對(duì)旋轉(zhuǎn),直到晶體和背景同樣暗。

偏光顯微鏡聚光鏡

在偏振光顯微鏡的基本臺(tái)下聚光建設(shè)是從一個(gè)普通的聚光鏡在明顯微鏡使用的沒(méi)有什么不同。 在各種形式的顯微鏡,聚光光學(xué)校正的程度應(yīng)該與物鏡一致。 偏光顯微鏡的典型的實(shí)驗(yàn)室有一個(gè)消色差透鏡,無(wú)應(yīng)變聚光鏡的數(shù)值孔徑0.90和1.35之間的范圍內(nèi),和一個(gè)外開(kāi)式的,將提供均勻的照明,在非常低的(2至4倍)的放大倍率(在圖5中示出)的透鏡元件。 除去擺動(dòng)透鏡改變聚光鏡,使一個(gè)更大的試樣區(qū)域的照明,以允許更大的視場(chǎng)提供均勻照明的低倍率物鏡的焦距。 這是理想的低倍率用于查看無(wú)畸變模式晶體和其他雙折射材料的偏光顯微鏡。

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是要研究的干涉圖樣時(shí),擺動(dòng)透鏡可以快速地被帶入的光路,并選擇用于在錐光觀察高數(shù)值孔徑的物鏡。 重要的是,聚光鏡的數(shù)值孔徑足夠高,以提供足夠的照明觀看錐光圖像。 如果插入最佳的聚光透鏡,當(dāng)利用高倍率物鏡,將導(dǎo)致惡劣的照明條件,并可能會(huì)導(dǎo)致具有不平坦的背景的顯微照片或數(shù)字圖像。 此外,因?yàn)閳A錐體的照明器和聚光鏡的數(shù)值孔徑的減小沒(méi)有最佳的透鏡,顯微鏡的分辨率將受到影響,導(dǎo)致細(xì)標(biāo)本細(xì)節(jié)的損失。

聚光鏡孔徑光闌控制照明錐的角度,通過(guò)顯微鏡的光學(xué)列車。 減少的開(kāi)口大小的可變光闌減小錐角,并通過(guò)目鏡觀察到的圖像的對(duì)比度增加。 然而,應(yīng)當(dāng)指出,聚光鏡孔徑光闌不打算作為一種機(jī)制來(lái)調(diào)整,代表要被控制的電壓加到燈的照度。 一些偏振光顯微鏡都配有一個(gè)固定的聚光鏡(無(wú)搖擺透鏡),其目的是提供錐光偏振和無(wú)畸變的照明的要求之間的一種折衷。 的照明收斂程度的變化可以通過(guò)調(diào)整聚光鏡的孔徑光闌,或通過(guò)升高或降低所述聚光鏡(盡管后者的技術(shù)是不推薦的關(guān)鍵檢查)。

旋轉(zhuǎn)圓載物臺(tái)

早期的偏振光顯微鏡利用固定載物臺(tái),機(jī)械地聯(lián)接,同步旋轉(zhuǎn),繞光軸的偏振器和分析器。 雖然此配置很麻煩按今天的標(biāo)準(zhǔn),它的優(yōu)點(diǎn)是不要求的的舞臺(tái)軸和顯微鏡的光軸之間的重合。 現(xiàn)代偏振光顯微鏡通常配有專門(mén)設(shè)計(jì)的360度可旋轉(zhuǎn)的圓形的階段,如圖6所示,這緩解在偏振光下進(jìn)行定向研究的任務(wù)類似。 所示圓形階段的圖6中的功能分為1度的增量測(cè)角器,并具有放置兩個(gè)verniers(未示出)相隔90度,與點(diǎn)擊(鎖銷或卡爪)停止定位在45度的步驟。 使用一個(gè)精密球軸承運(yùn)動(dòng),確保極其精細(xì)的控制權(quán),這讓verniers顯微鏡讀取精度0.1度附近的旋轉(zhuǎn)角度。 可以使用鉗位固定階段,使標(biāo)本可以定位在一個(gè)固定的角度相對(duì)于偏振器和分析器。

在偏光顯微鏡的的圓形舞臺(tái)取向上的最關(guān)鍵方面是要確保該階段內(nèi)的視場(chǎng)顯微鏡的光軸為中心。 這是通過(guò)位于圖6中所示的階段的前部的兩個(gè)定心旋鈕。 在對(duì)準(zhǔn)過(guò)程的第一個(gè)步驟是相對(duì)于聚光鏡,視場(chǎng),和在顯微鏡的光軸為中心的顯微鏡物鏡。 研究級(jí)偏光顯微鏡物鏡轉(zhuǎn)換器的固定螺絲,一對(duì)小使個(gè)人物鏡為中心,通過(guò)一個(gè)六角扳手。 每一個(gè)物鏡應(yīng)該獨(dú)立于光軸中心,根據(jù)制造商的建議,同時(shí)觀察試樣的圓形舞臺(tái)上。 有些顯微鏡提供個(gè)人物鏡對(duì)中,而其他中心定位系統(tǒng)操作作為一個(gè)單元的物鏡轉(zhuǎn)換器。 為中心的物鏡后,應(yīng)把舞臺(tái)中的視場(chǎng)的中心,這將在顯微鏡的光軸一致。 階段正確居中時(shí),十字線分劃板的中心放置在一個(gè)特定的標(biāo)本細(xì)節(jié)不應(yīng)超過(guò)0.01毫米的位移一個(gè)完整的360度旋轉(zhuǎn)的階段后,從顯微鏡光軸。 在一般情況下,顯微鏡的設(shè)計(jì)階段或與光軸一致的物鏡,但不能同時(shí)進(jìn)行調(diào)整。 有些設(shè)計(jì)物鏡是在物鏡轉(zhuǎn)換器帶有一個(gè)可調(diào)節(jié)的圓形舞臺(tái)的固定位置,而其他位置和鎖定的階段,允許中心定位的物鏡。

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中心定位的旋轉(zhuǎn)的圓形舞臺(tái)中的錯(cuò)誤可能會(huì)導(dǎo)致病情加重時(shí)用偏振光顯微鏡檢查雙折射標(biāo)本。 如果階段的旋轉(zhuǎn)中心與視場(chǎng)的中心不重合,正在研究的一個(gè)特征時(shí),可能會(huì)消失階段是旋轉(zhuǎn)。 作為物鏡放大倍數(shù)增大(導(dǎo)致一個(gè)更小的視場(chǎng)),該字段的視圖中心的旋轉(zhuǎn)軸線之間的差異變得更大。 在最高放大倍數(shù)(60倍和100倍),即使是微小的錯(cuò)誤可能會(huì)導(dǎo)致在中心定位標(biāo)本放置階段是旋轉(zhuǎn)的巨大差異。

在圖6中的左側(cè)所示的圓形的顯微鏡載物臺(tái)上包含的目的是確保在用顯微鏡觀察試樣在一對(duì)彈簧夾。 一個(gè)可選的機(jī)械載物臺(tái),用于使用的圓形舞臺(tái)上示出在圖6的右側(cè)。 這個(gè)階段是一個(gè)低調(diào)的模型,有一個(gè)跨旅游運(yùn)動(dòng)約25×25毫米,用游標(biāo)畢業(yè)記錄在試樣上的特定位置。 機(jī)械載物臺(tái)被緊固到預(yù)鉆孔的圓形舞臺(tái)上,并與兩個(gè)齒條與小齒輪的齒輪組由x和y平移旋鈕控制試樣被翻譯。 一個(gè)機(jī)械的階段允許使用的試件的精確定位,但,突出翻譯旋鈕往往會(huì)干擾物鏡的自由轉(zhuǎn)動(dòng),甚至可以與它們碰撞。

在過(guò)去,一些制造商提供了一個(gè)通用的附件為圓偏振光顯微鏡階段。 此附件可以以精確地定位在光路中的選擇晶粒兩片玻璃之間的半球和幾個(gè)軸的繞固定的礦物薄截面。 普及階段是觀察選擇光學(xué)晶體,和紋理特征,得到線索的結(jié)構(gòu)半結(jié)晶標(biāo)本。 另一個(gè)階段,有時(shí)是實(shí)用程序,在測(cè)量的雙折射和折射率主軸階段的適配器,這也被直接安裝到圓形的階段。 試樣顆粒被固定在主軸端部,這是定位在基板上,允許主軸繞一水平軸樞轉(zhuǎn),同時(shí)保持谷物油浸漬在玻璃窗口和蓋玻片之間。 雖然目前很難獲得這些階段,他們能證明寶貴的定量偏振光顯微鏡調(diào)查。

偏光顯微鏡物鏡

可以消色差光學(xué)校正偏振光物鏡,計(jì)劃消色差,或計(jì)劃螢石。 復(fù)消色差的物鏡應(yīng)該避免,因?yàn)樗请y以去除所有殘余應(yīng)力和應(yīng)變從眾多鏡頭元素和緊張的坐騎從舊的固定管長(zhǎng)度顯微鏡。 然而,最近已經(jīng)取得了進(jìn)步物鏡設(shè)計(jì)無(wú)限遠(yuǎn)校正顯微鏡高品質(zhì)的應(yīng)變復(fù)消色差的物鏡是有用的微分干涉對(duì)比或考試雙折射標(biāo)本正交偏光照明。 平均數(shù)值孔徑的20倍和40倍的偏振光物鏡通常是10%至25%,高于普通顯微鏡的錐光干涉圖樣的觀察,因?yàn)樾枰邤?shù)值孔徑。 偏光顯微鏡設(shè)計(jì)的物鏡必須是應(yīng)力和應(yīng)變。 大多數(shù)制造商進(jìn)行徹底的測(cè)試偏光顯微鏡上使用而設(shè)計(jì)的物鏡,只選擇那些通過(guò)嚴(yán)格的測(cè)試。

polarizedobjectives

可能出現(xiàn)不必要的雙折射在顯微鏡物鏡主要通過(guò)兩種機(jī)制。 第一個(gè)是“天然”的雙折射,這是一個(gè)用于使鏡片的眼鏡,晶體和其他材料的的固有各向異性字符的工件。 為了規(guī)避這個(gè)問(wèn)題,廠家選擇無(wú)應(yīng)變光學(xué)玻璃或各向同性晶體構(gòu)造鏡片。 第二種類型是“應(yīng)變”的雙折射時(shí),會(huì)發(fā)生多個(gè)透鏡膠合在一起,并安裝在靠近幀緊緊貼合。 應(yīng)力雙折射也發(fā)生掉落或處理的物鏡,由于受損的結(jié)果。

通過(guò)壓力測(cè)試的物鏡是標(biāo)有PPOL,通常標(biāo)有紅色刻有字母。 一些制造商還可以使用一臺(tái)黑色或暗灰色桶(帶或不帶紅色字母)快速識(shí)別應(yīng)變免費(fèi)偏振光的物鏡(如圖7所示)。 當(dāng)兩個(gè)物鏡和聚光鏡的應(yīng)力和應(yīng)變,在顯微鏡視場(chǎng)的背景出現(xiàn)了很深的黑色固體時(shí)通過(guò)目鏡觀察,正交偏光之間沒(méi)有一個(gè)標(biāo)本。 在這些光學(xué)元件,可以給任何壓力上升到一個(gè)可觀的程度各向異性特征,稱為內(nèi)部雙折射。 這將導(dǎo)致在顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)本身的檢體干擾效應(yīng)的貢獻(xiàn),往往可以使以圖像非常困難。 在光學(xué)系統(tǒng)中的應(yīng)力和/或應(yīng)變的證據(jù)存在觀察標(biāo)本時(shí),通常有一個(gè)黑色的背景的藍(lán)色,灰色或褐色的背景可以通過(guò)以下方式獲得。

偏光顯微鏡專為一對(duì)典型的物鏡是在圖7中。 物鏡桶被漆成黑色平都裝飾有紅色字體表示具體的物鏡的能力,并指定其無(wú)應(yīng)變條件偏振光。 切掉的物鏡圖揭示了內(nèi)部鏡頭元件,色差和球面像差糾正。 在左邊的物鏡是一個(gè)低功耗的雙折射標(biāo)本在低倍率4倍的物鏡。 前透鏡元件是大于40倍物鏡在右邊,因?yàn)樵黾右晥?chǎng)的照明要求享有的低功耗物鏡。 偏振光物鏡范圍內(nèi)約2倍到100倍的放大倍率,最常見(jiàn)的是4X,10X,20,和40倍,一個(gè)選擇供應(yīng)大部分在畸變和錐光模式標(biāo)本檢查的目的。

遲緩和配件板

幾乎所有的偏振光顯微鏡都配有物鏡轉(zhuǎn)換器和偏振器和分析器之間的上述管體中的一個(gè)插槽。 此插槽的目的是,以容納一個(gè)附件或相位差板,在偏振器和分析器的振動(dòng)方向相對(duì)于一個(gè)特定的方向。 原來(lái),插槽為導(dǎo)向,其長(zhǎng)軸指向東北 - 西南從目鏡中觀察到,但更近的顯微鏡有東南 - 西北方向改變。 舊顯微鏡,槽的尺寸為10×3毫米,但現(xiàn)在已經(jīng)規(guī)模標(biāo)準(zhǔn)(DIN規(guī)格)20×6毫米。 當(dāng)配件/相位差板,覆蓋物沒(méi)有插入主體管,往往是嵌合,以防止灰塵進(jìn)入顯微鏡通過(guò)槽。

compensators

相位差板是由一個(gè)精確的厚度和光學(xué)各向異性石英,云母或石膏礦物地面安裝在兩個(gè)窗口之間具有平坦面(平面)。 在這些板產(chǎn)生特定的光學(xué)路徑長(zhǎng)度差(OPD)的相互垂直的平面偏振的光波斜地插入時(shí),在交叉的偏振器之間的顯微鏡。 三種最常見(jiàn)的相位差板產(chǎn)生的整個(gè)波長(zhǎng)范圍在530和570納米之間,四分之一波長(zhǎng)(137-150納米),或利用一個(gè)楔形設(shè)計(jì),涵蓋了通過(guò)以下方式獲得一個(gè)變量的路徑長(zhǎng)度的光路長(zhǎng)度的差異波長(zhǎng)的寬譜(最多6個(gè)訂單或約3000納米)。

石英楔補(bǔ)償器的最簡(jiǎn)單的例子,這是利用不同的光路長(zhǎng)度差,以提供相同的試樣,無(wú)論是由插入的光軸的程度或以其他方式。 通常被稱為甲全波片作為一個(gè)敏感的色彩一階的紅色板,因?yàn)樗a(chǎn)生了具有類似的色調(diào)看到在米歇爾征收?qǐng)D表中的一階紅色的干涉色。 大齡補(bǔ)償作了裂解石膏,以適當(dāng)?shù)暮穸?,?shí)現(xiàn)了一階的紅色,并且可能被標(biāo)記的石膏板 , 紙面石膏   , 一個(gè)λ,Δ= 530 nm的框架殼體。 如果印版起源于德國(guó),它可能會(huì)被標(biāo)記的腐老子 。四分之一波片(有時(shí)稱為云母板)通常是從老式的石英或云母晶體夾在兩片玻璃之間的窗口,就像一階板。 根據(jù)不同的制造商,四分之一波板可能被標(biāo)記云母 , 微光,1/4λ,Δ= 147納米 。 一階紅色和四分之一波長(zhǎng)板通常安裝在滑動(dòng)板通過(guò)補(bǔ)償器的插槽,并進(jìn)入光學(xué)路徑的長(zhǎng)矩形幀。晚模型顯微鏡結(jié)合成一個(gè)單一的框架,有三個(gè)開(kāi)口:一個(gè)一階的紅盤(pán),四分之一波片,和一個(gè)中央開(kāi)口,無(wú)一板塊用于平面偏振光沒(méi)有補(bǔ)償這些板塊。 此外,這些板材鏡架旋鈕在每年年底是大于槽尺寸,以確保板不能被丟棄,借用,或被盜。

使用補(bǔ)償板時(shí)的一個(gè)主要考慮因素是建立允許緩慢振動(dòng)矢量方向。按照慣例,這個(gè)方向?qū)⑹菛|北-西南,在圖像中,將被標(biāo)記為z'的,或γ,但它也可以在所有幀上的慢軸將不會(huì)被標(biāo)記。確定遲緩或補(bǔ)償板緩慢振動(dòng)軸的一個(gè)方便的方法是采用晶體的長(zhǎng)軸平行的東北-西南方向的板塊,板塊觀察雙折射晶體(如尿素)。如果有一個(gè)另外的光程差的相位差板被插入時(shí)(當(dāng)顏色移動(dòng)米歇爾征收規(guī)模),然后緩慢板的振動(dòng)方向行進(jìn)的長(zhǎng)軸平行。另外,如果是有區(qū)別的(減法)之間的光路,則相位差板的慢軸垂直于長(zhǎng)軸的框架。

補(bǔ)償板的特性
板式光程差
(OPD -納米)
評(píng)論
四分之一波長(zhǎng)140灰色干擾色調(diào)
全波540-570一階紅 
 
敏感的色調(diào)
石英楔子0-3000刻度尺 
以上 
六訂單
巴比涅0-3000雙床反對(duì)
石英楔子
賴特0-3000組合 
石英楔子
馬戲團(tuán)0-3000孿生石英楔子 
 
平行板
括號(hào)克勒0-3000組合 
云母挖起桿
Sénarmont0-540(570)橢圓偏振 
 
旋轉(zhuǎn)儀
橢圓的0-540(570)旋轉(zhuǎn)板 
 
垂直軸
貝雷0-2800擺式方解石 
盤(pán)
Ehringhaus0-2800雙旋轉(zhuǎn)
石英板
表1

舊偏振光顯微鏡可能有提供伯特蘭透鏡的中心定位,讓中心的物鏡后孔配合目鏡十字線的交叉點(diǎn)。一些上了年紀(jì)的顯微鏡也有可變光闌的位置附近的中間圖像平面或勃氏鏡,可以調(diào)整(縮小尺寸),在錐光偏振模式下操作顯微鏡時(shí),小晶體獲得更清晰的干擾數(shù)字。如果膜片被錐光觀察后,再次打開(kāi)時(shí),被限制在顯微鏡的視場(chǎng)被返回到無(wú)畸變觀看模式。此隔膜,如果存在,被操作由一個(gè)控制桿或凸邊環(huán),或者安裝在顯微鏡主體管或觀察頭(中間圖像平面內(nèi)或附近;圖9)。后來(lái)模型顯微鏡往往伯特蘭透鏡安裝在炮塔一起改變圖像的放大倍率的鏡頭。是用一個(gè)小旋鈕,伯特蘭透鏡的位置,以及0或其他一些放大倍率鏡頭標(biāo)記的pH調(diào)整甲勃氏鏡也可以作為配置相襯物鏡的望遠(yuǎn)鏡提供物鏡的后側(cè)焦點(diǎn)面與疊加的相位環(huán)在聚光鏡相位板纖維環(huán)的放大圖像。

目鏡(目鏡)

早期偏振光顯微鏡,如明場(chǎng),往往配備單筒觀測(cè)管和一個(gè)單一的目鏡。再加照明反射臺(tái)下鏡,這些顯微鏡并沒(méi)有提供足夠的照明,可視化和拍攝非常弱雙折射標(biāo)本。雖然成本低的學(xué)生顯微鏡還配備單眼觀看頭,大多數(shù)現(xiàn)代研究級(jí)偏光顯微鏡雙目或三目觀察管系統(tǒng)。眼管通常是兩眼間的距離,以適應(yīng)瞳分離的顯微鏡(通常為55至75毫米之間)的范圍內(nèi)可調(diào)。

許多偏振光顯微鏡都配有一個(gè)目鏡屈光度調(diào)節(jié),這應(yīng)該是每個(gè)目鏡個(gè)別。有些顯微鏡梯度范圍,每個(gè)目鏡上,該值指示的位置相對(duì)于目鏡主體眼睛的晶狀體。其他模型有目鏡在一個(gè)固定位置固定用銷和槽眼管體的。屈光度調(diào)整的第一步是為行了分級(jí)配備這些標(biāo)記的目鏡上的標(biāo)記(圖10),或轉(zhuǎn)動(dòng)眼球鏡頭順時(shí)針最短焦距位置。接下來(lái),重點(diǎn)標(biāo)本與10倍的物鏡,然后旋轉(zhuǎn)物鏡,直到一個(gè)低倍物鏡(通常是5倍)以上的標(biāo)本。此時(shí),每只眼睛的鏡頭重新聚焦單獨(dú)(不使用顯微鏡粗或細(xì)的重點(diǎn)機(jī)制),直到樣本中大家關(guān)注的焦點(diǎn)。光路和調(diào)整顯微鏡的微調(diào)旋鈕旋轉(zhuǎn)20倍的物鏡。重復(fù)眼睛晶狀體屈光度調(diào)整與5倍的物鏡(再次不擾亂顯微鏡微調(diào)對(duì)焦機(jī)制),和顯微鏡應(yīng)調(diào)整到正確的屈光度設(shè)置。這些設(shè)置會(huì)有所不同,從用戶到用戶,所以記錄目鏡眼透鏡的位置,如果有一個(gè)漸變的規(guī)模快速返回適當(dāng)調(diào)整。

如上所述,可以面向薄編制以及形棱柱尿素的微晶無(wú)論是南北或東西參考目鏡的十字。然后,作為一對(duì)偏振器可旋轉(zhuǎn),以獲得組合的背景和晶體的最小強(qiáng)度。如果兩個(gè)偏振片可以旋轉(zhuǎn),這一過(guò)程可能會(huì)產(chǎn)生南北或東西設(shè)置的偏振片。前者的方向是優(yōu)選的,因?yàn)樗且阎?,其振?dòng)方向與偏振器相比,可以設(shè)置。

聚光鏡可以通過(guò)減少照明系統(tǒng)的視場(chǎng)光闌(位于前面的聚光透鏡)的大小,然后轉(zhuǎn)換聚光鏡,使圖像通過(guò)目鏡觀察時(shí)的振動(dòng)板的邊緣是鋒利的重點(diǎn)和中心。接著,視場(chǎng)光闌,應(yīng)通過(guò)使用聚光鏡調(diào)節(jié)翼形螺釘安裝固定在聚光鏡上的的臺(tái)下殼體,在視場(chǎng)的中心。隔膜(聚光鏡)為中心后,葉片可被打開(kāi),直到整個(gè)視場(chǎng)的被照亮。

燈絲,使進(jìn)入聚光鏡的前焦面(科勒照明的要求),通過(guò)改變聚光透鏡的焦點(diǎn)應(yīng)集中的鎢螺旋線是可見(jiàn)的。聚光鏡的前焦平面所在或附近的平面的照明光圈(聚光鏡)隔膜。由于后側(cè)焦點(diǎn)面上的物鏡是在一個(gè)平面上的共軛到聚光鏡中,它有可能通過(guò)除去目鏡或插入的勃氏鏡觀察燈絲圖像。當(dāng)觀看的干涉條紋在錐光模式,它往往是聘請(qǐng)以彌漫燈絲形象在物鏡上的后焦平面附近的燈聚光透鏡部分蛋白石玻璃或磨砂濾波器的方便。

在以與物鏡的數(shù)值孔徑相匹配,聚光鏡孔徑光闌必須加以調(diào)整,同時(shí)觀察物鏡的后側(cè)焦點(diǎn)面。再次,勃氏鏡觀察聚光鏡照明光圈和物鏡孔徑之間的關(guān)系提供了一種方便的機(jī)制。偏振光對(duì)于大多數(shù)研究中,聚光鏡光圈的直徑應(yīng)設(shè)置為約90%的物鏡的數(shù)值孔徑。

雖然不是必需的,中心的旋轉(zhuǎn)臺(tái)是很方便的,如果測(cè)量進(jìn)行或標(biāo)本通過(guò)大角度轉(zhuǎn)動(dòng)。最簡(jiǎn)單的方法是找到一個(gè)小的檢體的功能(作為標(biāo)記)和移動(dòng)的功能,進(jìn)入中心的旋轉(zhuǎn)軸線的階段。此位置可能不與視場(chǎng)中心重合,目鏡十字準(zhǔn)線所定義的。使用靠近舞臺(tái)的中心定位旋鈕或按鍵,標(biāo)記功能可以被翻譯(通過(guò)試驗(yàn)和錯(cuò)誤),直到其旋轉(zhuǎn)中心與視場(chǎng)中心重合。一些偏振光顯微鏡允許獨(dú)立定心在消防水***的物鏡。如果是這樣的話,應(yīng)之前完成此任務(wù)嘗試階段的中心定位。

結(jié)論

往往是利用偏振光顯微鏡由天然礦物和巖石薄片,礦物學(xué)家,并在研究和工業(yè)環(huán)境中的陶藝研究的地質(zhì)學(xué)家。該技術(shù)也大量雇用的科學(xué)家研究各種相變和紋理表現(xiàn)出液晶化合物,聚合物技術(shù)人員經(jīng)常利用偏振光顯微鏡所提供的信息做出顯著。法醫(yī)科學(xué)家利用偏振光纖維,毛發(fā),和其它微粒,發(fā)現(xiàn)在犯罪現(xiàn)場(chǎng)的分析技術(shù)。近日,偏振光的優(yōu)勢(shì)已被用來(lái)探索生物過(guò)程,比如有絲分裂紡錘體的形成,染色體凝結(jié),大分子組件,如膠原蛋白,淀粉樣蛋白,髓鞘的軸突,肌肉,軟骨,骨組織。