徠卡顯微鏡,谷物種子蛋白質(zhì)運(yùn)動
種子積累蛋白質(zhì)和淀粉會被分解,并在發(fā)芽動員。 其中種子,谷物構(gòu)成,構(gòu)成高達(dá)80%的種子總體積的高度專業(yè)化的存儲組織的一個例子。種子內(nèi)膜系統(tǒng)是高度專業(yè)化和種子貯藏蛋白穿過內(nèi)膜系統(tǒng)旅行途中對蛋白質(zhì)體,這是無論是從液泡起源的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(ER)或衍生。在大多數(shù)谷類醇溶蛋白是主要的類,它形成的ER衍生的蛋白質(zhì)體貯藏蛋白。 然而,一些品種如小麥,燕麥或大麥同時包含醇溶蛋白和球蛋白的積聚在蛋白質(zhì)貯藏液泡的變量值。
谷類種子儲存蛋白在穩(wěn)定的環(huán)境中的天然能力已成功地利用,使用谷物作為用于生產(chǎn)藥物的興趣重組蛋白的平臺,出于這個原因,對于蛋白質(zhì)的不同販賣路線的調(diào)查一直受到一些研究的,因為*終的儲存場地以及路由隨后的重組蛋白具有在*后的產(chǎn)量,例如產(chǎn)品的質(zhì)量和產(chǎn)生影響。
利用熒光顯微鏡和電子顯微鏡與在不同的系統(tǒng)(單子葉植物和雙子葉植物)生產(chǎn)的重組糖蛋白聚糖結(jié)構(gòu)的分析組合允許獲得一個更深入的了解的話題。 事實上,我們已經(jīng)證明了蛋白質(zhì)貯藏液泡玉米中的存在,我們已經(jīng)證明,在蛋白質(zhì)的谷物胚乳和雙子葉植物種子販運(yùn)的關(guān)鍵差異。 因此,在谷物胚乳細(xì)胞蛋白質(zhì)貯藏液泡是該進(jìn)入內(nèi)膜系統(tǒng)和不帶進(jìn)一步瞄準(zhǔn)信號的重組蛋白的*目的地。相同的蛋白質(zhì)有效地分泌在雙子葉植物的種子像煙草或擬南芥,體現(xiàn)了很高的專業(yè)化谷物胚乳,不活過萌發(fā)和其*目的是蛋白質(zhì)和淀粉的存儲一個垂死的組織
重組*植酸酶在玉米胚乳細(xì)胞中沉積
圖1:重組*植酸酶在玉米胚乳細(xì)胞中沉積
圖1顯示了在玉米胚乳細(xì)胞的重組*植酸酶的沉積。 重組*植酸酶攜帶的信號肽并沒有進(jìn)一步的定位信號表達(dá)于玉米胚乳。 胚乳的切片對應(yīng)于一個中間的發(fā)育階段被切斷用刀片和固定于4%多聚甲醛和0.5%戊二醛。
通過乙醇系列脫水后,將樣品滲透和嵌入LRWhite樹脂和塊被允許中聚合在60℃。 半薄切片(1微米),得到用Leica ULTRACUT UCT和甲苯胺藍(lán)染色(A)或用于免疫熒光研究(B)。
*薄切片(80納米)也獲得并用醋酸鈾1%和重組植酸酶的免疫定位后檸檬酸鉛3%的徠卡EM AC20。 光線和免疫熒光照片拍攝用Leica DM5500。 *薄切片進(jìn)行觀察與飛利浦EM-400型電子顯微鏡。
看到不同的蛋白質(zhì)的細(xì)胞器存儲在一個中間發(fā)展階段胚乳細(xì)胞:蛋白質(zhì)貯藏液泡(箭頭)和玉米醇溶蛋白體(箭頭)。 以及周圍的玉米醇溶蛋白體(C,ZB),肌醇六磷酸酶在蛋白貯藏液泡(C,PSV,箭頭B,箭頭)意外地析出。 淀粉(S)。 酒吧10微米(A,B),1微米(C)。