尼康顯微鏡相差和DIC顯微鏡的比較

微分干涉對(duì)比（DIC）和相差顯微鏡之間*根本的區(qū)別是在其上的圖像是由互補(bǔ)的技術(shù)形成的光學(xué)基礎(chǔ)。標(biāo)本由這些對(duì)比增強(qiáng)方法研究產(chǎn)生往往是完全不同的外觀和性格時(shí)，客觀地比較圖像。這種互動(dòng)式教程探討很多相襯和DIC顯微鏡拍攝的圖像之間表現(xiàn)出的異同。

本教程初始化一個(gè)隨機(jī)選擇的樣本出現(xiàn)的標(biāo)本圖像窗口和對(duì)比度機(jī)制滑塊也設(shè)置為一個(gè)隨機(jī)位置。為了操作的教程，使用鼠標(biāo)光標(biāo)移動(dòng)到翻譯對(duì)比度機(jī)制的滑塊之間的相位對(duì)比圖像（滑塊移到*左邊）和DIC圖像（滑塊移到*右邊）位置。當(dāng)滑塊從一個(gè)對(duì)比度機(jī)構(gòu)移動(dòng)到另一個(gè)時(shí)，該圖像改變字符并開始獲取新的對(duì)比機(jī)制的屬性。不同的樣品可以從調(diào)色板中使用的選擇中選擇一個(gè)標(biāo)本下拉菜單。

相差顯微鏡產(chǎn)生的圖像強(qiáng)度（振幅），該變化作為試樣的光程長(zhǎng)度數(shù)量級(jí)的函數(shù)值，具有非常密集的區(qū)域（那些具有大的路徑長(zhǎng)度）出現(xiàn)比背景暗。可替換地，試件具有相對(duì)低的厚度值的功能，或折射率小于周圍介質(zhì)，在標(biāo)準(zhǔn)（正）相造影劑的灰色背景重疊時(shí)，呈現(xiàn)輕得多。

這種情況是相當(dāng)不同的對(duì)微分干涉對(duì)比，其中的光路長(zhǎng)度的梯度（在效果上的變化的波陣面的方向的速度剪切）主要負(fù)責(zé)對(duì)比度。在路徑長(zhǎng)度陡梯度產(chǎn)生優(yōu)異的對(duì)比度，和圖像顯示的偽三維浮雕陰影，這是DIC的技術(shù)特性。具有很淺的光路的斜坡，如那些在延長(zhǎng)，扁平的樣品觀察到的區(qū)域，產(chǎn)生微不足道的對(duì)比度，經(jīng)常在相同強(qiáng)度水平作為背景出現(xiàn)在圖像中。

除了在對(duì)比的形成機(jī)制的差異，DIC和相襯圖像的不同之處的一些其它特征。圖1所示是在比較中DIC和相襯捕獲標(biāo)本幾個(gè)數(shù)字圖像。一個(gè)人類口腔上皮細(xì)胞暴露于在DIC的上表面上的核和眾多的細(xì)菌是在圖1（a）所示，與相同的視場(chǎng)與圖1中相位對(duì)比（b）所示。相襯圖像設(shè)有蜂窩周和細(xì)胞核周圍明顯的暈圈，其不存在于所述的DIC圖像。光學(xué)切片的DIC調(diào)查（未示出）表明，該細(xì)菌是存在于該沐浴在周圍介質(zhì)相對(duì)于躺在小區(qū)的下側(cè)的膜表面上。這一事實(shí)不能明確相襯確定。

在圖1（c）中，鼠腎組織成像，用DIC厚部分顯示的細(xì)胞封裝在細(xì)管的一個(gè)包。在同一地區(qū)的相襯圖像（圖1（d））的混亂及由相的暈圈的聚焦平面以外的存在的干擾。然而，一些蜂窩晶核出現(xiàn)的相位對(duì)比圖像，這是沒有區(qū)別的DIC中可見。相對(duì)的高放大視圖Obelia在DIC和相襯息肉稠干perisarc如圖圖1（e）示出了和圖1（f）所示，分別 在DIC時(shí)，（圖1（e））的環(huán)狀結(jié)構(gòu)出現(xiàn)半球形內(nèi)部的光線從干發(fā)出。另外，粒狀顆粒的莖結(jié)構(gòu)中可見，但解剖細(xì)節(jié)在很大程度上是不確定的。相襯圖像（圖1（f））的是由周圍的圓環(huán)光暈和桿內(nèi)混淆。

微分干涉對(duì)比*過相差的主要優(yōu)點(diǎn)是，利用儀器滿數(shù)值孔徑沒有相位片或聚光器的環(huán)的掩蔽效應(yīng)，這嚴(yán)重限制了聚光鏡和物鏡孔的尺寸的能力。主要優(yōu)勢(shì)在于提高軸向分辨率，特別是相對(duì)于所述的DIC顯微鏡的大孔徑尺寸，以產(chǎn)生良好的高分辨率圖像的能力。